(Srauto citometrija, FCM) yra ląstelių analizatorius, matuojantis dažytų ląstelių žymenų fluorescencijos intensyvumą. Tai yra aukštųjų technologijų technologija, sukurta remiantis atskirų ląstelių analize ir rūšiavimu. Tai gali greitai išmatuoti ir klasifikuoti dydį, vidinę struktūrą, DNR, RNR, baltymus, antigenus ir kitas ląstelių fizikines ar chemines savybes ir gali būti pagrįstas šių klasifikacijų rinkimu.
Srauto citometrą daugiausia sudaro šios penkios dalys:
1 srauto kameros ir skysčių sistema
2 lazerio šviesos šaltinis ir pluošto formavimo sistema
3 optinė sistema
4 elektronikos, saugojimo, ekrano ir analizės sistema
5 ląstelių rūšiavimo sistema
Tarp jų lazerio sužadinimas lazerio šviesos šaltinio ir sijos formavimo sistemoje yra pagrindinis fluorescencinių signalų matavimas srauto citometrijoje. Sužadinimo šviesos intensyvumas ir ekspozicijos laikas yra susijęs su fluorescencijos signalo intensyvumu. Lazeris yra nuoseklus šviesos šaltinis, galintis užtikrinti vieno bangos ilgio, didelio intensyvumo ir didelio stabilumo apšvietimą. Tai yra idealus sužadinimo šviesos šaltinis, norint patenkinti šiuos reikalavimus.
Tarp lazerio šaltinio ir srauto kameros yra du cilindriniai lęšiai. Šie lęšiai sutelkia lazerio pluoštą su apskritu skerspjūviu, išmetamu iš lazerio šaltinio į elipsės formos pluoštą su mažesne skerspjūviu (22 μm × 66 μm). Lazerio energija šioje elipsės formos pluošte pasiskirsto pagal normalų pasiskirstymą, užtikrinant nuoseklų ląstelių aptikimo plotą einančių ląstelių apšvietimo apšvietimo intensyvumą. Kita vertus, optinę sistemą sudaro keli objektyvų, smeigtukų ir filtrų rinkiniai, kuriuos galima apytiksliai suskirstyti į dvi grupes: aukščiau ir pasroviui nuo srauto kameros.
Optinę sistemą priešais srauto kamerą sudaro objektyvas ir smaigalys. Pagrindinė objektyvo ir smeigtuko funkcija (paprastai du lęšiai ir smaigalys) yra sutelkti lazerio pluoštą su apskritu skerspjūviu, kurį lazerio šaltinis skleidžia į elipsinį pluoštą su mažesniu skerspjūviu. Tai paskirsto lazerio energiją pagal normalų pasiskirstymą, užtikrindamas nuoseklų ląstelių aptikimo aptikimo srities apšvietimo intensyvumą ir sumažinant benamės šviesos trukdžius.
Yra trys pagrindiniai filtrų tipai:
1: Long Pass Filter (LPF) - leidžia praeiti tik šviesa, kurios bangos ilgiai yra didesni už specifinę vertę.
2: Trumpojo pralaidumo filtras (SPF) - leidžia praeiti tik šviesa, kurios bangos ilgis yra žemiau konkrečios vertės.
3: pralaidumo filtras (BPF) - leidžia praeiti tik tam tikro bangos ilgio diapazono šviesai.
Skirtingi filtrų deriniai gali nukreipti fluorescencinius signalus skirtingais bangos ilgiais, palyginti su atskirais fotomultiplier vamzdeliais (PMT). Pavyzdžiui, filtrai, skirti aptikti žalią fluorescenciją (FITC) priešais PMT, yra LPF550 ir BPF525. Filtrai, naudojami aptikti oranžinės raudonos fluorescenciją (PE) priešais PMT, yra LPF600 ir BPF575. Filtrai, skirti aptikti raudoną fluorescenciją (CY5) priešais PMT, yra LPF650 ir BPF675.
Srauto citometrija daugiausia naudojama ląstelių rūšiavimui. Tobulinant kompiuterinę technologiją, kuriant imunologiją ir išradus monokloninių antikūnų technologiją, jos pritaikymas biologijoje, medicinoje, vaistinėje ir kitose srityse tampa vis labiau paplitusios. Šios programos apima ląstelių dinamikos analizę, ląstelių apoptozę, ląstelių spausdinimą, naviko diagnozę, vaisto efektyvumo analizę ir kt.
Pašto laikas: 2012 m. Rugsėjo 21 d
